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    中文名:酵母阳性克隆检测试剂盒(杂交筛库)

    英文名:Positive clone assay

    CAS:N/A

    级别:N/A

    分子量:N/A

    分子式:N/A

    纯度:N/A

    储存条件:2-8℃

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    万博哪里下载编号 规格 目录价(¥) 优惠价(¥) 数量 操作
    20T
    198
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    200T
    698
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    万博哪里下载简介

    使用本试剂盒能够快速提取的酵母质粒,大幅减少酵母阳性克隆的鉴定时间。仅适用于通过PCR扩增的方法鉴定酵母阳性克隆或获得的PCR产物用于测序分析。如想获得纯度高酵母质粒请选用酵母质粒提取试剂盒(SK2410)。

    使用方法:

    一、酵母质粒提取

    1.吸取20 μL的酵母质粒快速提取缓冲液放入1.5 mL的离心管中。

    2.用无菌枪头挑取长度1~2 mm的酵母菌悬浮在装有缓冲液的离心管中。

    3.在95 °C的水浴锅或者金属浴中煮5 min-10 min。

    4.冰上放置2 min,常温条件下12,000 rpm,离心5 min,吸取上清移至新的离心管。得到的质粒可用于PCR分析。

    二、PCR扩增目的条带。

    建议每10 μL PCR反应体系加入1 μL提取的酵母质粒,40个PCR循环数。

    PCR反应体系:

    2.png

    PCR反应条件:

    3.png

    注意事项:

    1.建议提取酵母质粒前先把酵母克隆在平板上划1 cm左右的短线,生长2-3天后,挑取1~2 mm的酵母菌用做质粒提取。

    2.可根据酵母菌的多少适当增加或减少酵母质粒提取缓冲液的使用量。

    3.未使用的酵母质粒建议放在4 °C冰箱保存。

    4.如PCR结果不是很理想,建议将质粒梯度稀释作模板。

    5.在水浴之后放-80℃或-20℃冷冻后重复水浴一次,再离心取上清也会提高PCR产率。PCR反应体系可以比例扩大,但模板体积不应超过总体系体积的1/10。


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