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    中文名:4%组织细胞固定液/PFA固定液

    英文名:4% Tissue Fix Solution

    CAS:N/A

    级别:N/A

    分子量:N/A

    分子式:N/A

    纯度:N/A

    储存条件:2-8℃

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    万博哪里下载编号 规格 目录价(¥) 优惠价(¥) 数量 操作
    100ml
    60
    60
    500ml
    180
    98
    500ml×10
    1600
    798
    5L
    1500
    1500
    20L
    4500
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    万博哪里下载简介

     1. 4%多聚甲醛固定液(4% Paraformaldehyde Fix Solution, 4% PFA Fix Solution)是一种广泛用于免 疫 组 化 (Immunohistochemistry, IHC) 、 免 疫 荧 光 (Immunofluorescence, IF) 、 免 疫 细 胞 化 学 (Immunocytochemistry, IC)、流式分析(Fluorescence-activated cell sorting, FACS)等检测时组织、组织切片、细胞等生物样品固定的溶液。

     2. 组织学上,4%的多聚甲醛穿透力强,固定均匀,能使组织硬化,有利于切片。该固定剂造成的组织收缩少,损伤小,较为 温和,能很好的保存固有物质,保持组织的抗原性和细微结构。此外,多聚甲醛可用于固定并保存脂肪及脂类物质。

     3. 本万博哪里下载固定效果好、应用广,适用于各种常见细胞或组织的固定,对皮肤、肌肉、内脏等均有良好的固定效果,但主要作用于蛋白质,无法固定尿酸和糖类等。

     4. 固定液可使细胞或组织的蛋白质凝固,终止内源性或外源性酶反应,防止组织自溶或异溶,以保持原有结构和形态。对免疫组化而言更有原位保存抗原的作用,避免抗原失活或弥散。固定液种类很多,常见的有多聚甲醛、甲醛、戊二醛、乙醇、 丙酮等。其固定原理不同,各有优缺点。目前在科学研究中多聚甲醛应用最广,通过形成分子间的交联从而使细胞或组织的三维结构得以被固定。多聚甲醛是甲醛的聚合物,性质比甲醛稳定,且对抗原的破坏能力弱于甲醛,因此,科学研究中常用多聚甲醛作为固定剂。

     5. 本万博哪里下载由磷酸盐缓冲液溶解,pH 约为 7.2-7.4。

    使用说明:

     1. 对于细胞样品,去除培养液后,按照每六孔板一个孔加入 1 毫升固定液的比例,加入 4%多聚甲醛固定液。对于细胞涂片等其它细胞样品,加入固定液的量以充分盖住样品为准。通常室温固定 10-20 分钟即可,但固定较长时间,例如 1-2 小时也是可以的。后续需使用适当的洗涤液充分洗涤以去除残留的多聚甲醛。 

     2. 对组织切片,加入 4%多聚甲醛固定液量以充分覆盖切片为准,或使用染色架进行固定。通常室温固定 10-20 分钟即可完成固定,但切片较厚时可以固定较长时间,例如 1-2 小时。后续需使用适当的洗涤液充分洗涤以去除残留的多聚甲醛。 

     3. 对于组织块样品,浸泡入 4%多聚甲醛固定液中,室温或 4℃浸泡固定 2-24 小时。建议不超过 8 小时,除非组织块特别大,难以渗透。固定完成后,放入装有蒸馏水的离心管中清洗,每 15-30 分钟换一次,共 6-8 次,建议在摇床进行,或用流水冲洗 1-2 小时。随后梯度脱水,进行包埋。如果暂时不包埋可放入 70-75%的酒精中保存。

    注意事项: 

     1、不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同,应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。

     2、多聚甲醛虽然作用温和,但能硬化组织,固定时间过久会导致组织变脆,切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过 24 小时。

     3、醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基,使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或 完全掩盖某些抗原决定簇,使之不能充分暴露,可造成假阴性的染色,影响免疫组化结果。因此,4%多聚甲醛固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时,有时需要对抗原先进行修复,然后才能进行免疫染色等后续操作。

     4、本万博哪里下载对人体有害,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。

     5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。



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