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    中文名:Dispase II

    英文名:Dispase II

    CAS:42613-33-2

    级别:试剂级

    分子量:N/A

    分子式:N/A

    纯度:N/A

    储存条件:-20°C

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    万博哪里下载简介

    Dispase II (neutral protease, grade II)

        Dispase中文名称为中性蛋白酶,也称为分散酶,是一种非特异性的金属蛋白酶,被用来从各种不同组织或器官中消化细胞外基质,释放并制备原代单细胞;或用于细胞培养中的细胞收获或接种转移;也被用于防止悬浮细胞培养时的细胞意外结团。

        蛋白水解酶类,如胰蛋白酶、胶原酶和链酶蛋白酶都被用语来分散组织、分类细胞,但他们常伤害细胞,并且在培养时不稳定,甚至可能引入支原体污染。Dispase就没有这个问题,不会给细胞膜带来伤害,而且因为其来自细菌,故不会引入支原体或任何动物病毒;温度、pH、血清成分等的差异对Dispase影响很小。Dispase经稀释后其活性就大大降低,这也方便了后续的培养。Dispase甚至被加入细胞培养悬液中用于防止细胞团结。

    优势:

        该酶已被证实作用迅速有效又温和;

        细胞能保持完整,细胞膜无损;

        该酶非哺乳动物来源,不含支原体或动物病毒污染;

        对于温度、pH的改变、以及血清成分都很稳定;

        使用螯合剂或稀释就能简单灭活;

    酶活定义:

        1U是在检测条件下1分释放相当于1 umol酪氨酸的Folin阳性氨基酸或肽的酶量;DispaseII:≥0.8 U/mg (37℃,使用酪蛋白作为底物,pH 7.5);1U Dispase II基本相当于600U日本单位的Dispase。

    抑制剂: EDTA、EGTA、Hg2+、其他重金属。血清不会抑制酶活性。

    使用方法:

        用Hepes-buffered saline (50 mM Hepes/KOH pH 7.4, 150 mM NaCl)溶解Dispase至10 mg/ml,使用时用细胞培养液稀释到0.6-2.4 U/ml。不推荐高于2.4 U/ml的 工作浓度,可用0.22 um的无菌滤膜过滤除菌。

    保存方法:

        保存在2-8℃;配成溶液后,在2-8℃ 2周内使用有效,在-20°2个月内使用有效;不要反复冻融;储存液用Hepes盐缓冲液稀释后,2-8℃,3天内使用有效。



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